Здравствуйте! В продолжение разговора о бесплодных браках отмечу, что более 15% семейных пар во всем мире испытывают проблемы с зачатием, и 50% этих случаев вызваны мужским бесплодием. Повреждение генетического материала, такое как ДНК фрагментация сперматозоидов и их денатурация, может оказывать неблагоприятное влияние на оплодотворение и развитие эмбриона, являясь важным фактором мужского бесплодия.
- Показания к проведению анализа фрагментации ДНК сперматозоидов
- Анализы на фрагментацию ДНК спермы
- TUNEL анализ
- ISNT (insituник-трансляция)
- Анализ структуры хроматина сперматозоидов (SCSA)
- Метод ДНК комет (COMET анализ)
- Анализ дисперсии хроматина сперматозоидов – SCD
- Вспомогательные методы при ДНК фрагментации
- Внутриматочная инсеминация
- Экстракорпоральное оплодотворение
- Интрацитоплазматическая инъекция спермы
- Стратегии лечения пациентов с высоким уровнем повреждений ДНК спермы
- Влияние образа жизни
- Инфекционный контроль
- Пероральная антиоксидантная терапия
- Хирургическое вмешательство при варикозе вен яичек
- Отбор сперматозоидов на основе микроманипуляции
- Забор сперматозоидов из яичка
Показания к проведению анализа фрагментации ДНК сперматозоидов
1 | Идиопатическое бесплодие |
2 | Планирование ВМИ |
3 | Многократные не удачные попытки ЭКО/ИКСИ |
4 | Остановка развития эмбрионов |
5 | Неполноценное развитие бластоцист |
6 | Исследование образцов для банков спермы |
Фактически, у 15% пар с мужским бесплодием были обнаружены нормальные результаты анализа спермы. Таким образом, должны быть выполнены дополнительные тесты для оценки потенциала фертильности у мужчин. В последние 30 лет были введены новые методы тестирования для оценки аномалий спермы, что также касается определения целостности ДНК спермы.
Исследование фрагментации ДНК сперматозоидов определяет качество спермы как носителя ДНК-пакета. Повреждение ДНК, такое, как фрагментация и денатурация, может привести к бесплодию.
Специалисты в области репродукции человека отмечают, что оплодотворение сперматозоидами, имеющими поврежденные ДНК, может увеличить риск генетических заболеваний у детей. Особенно подчеркну, что такие нарушения могут быть выявлены даже у мужчин с нормальными результатами анализа спермы.
Поэтому тест на определение ДНК фрагментации сперматозоидов, как независимого показателя для оценки качества спермы, включили в программу обязательных анализов у бесплодных пар. Особенно потому, что внутрицитоплазматическая инъекция сперматозоидов при проведении ЭКО сейчас широко распространена во всем мире, случаи успешного оплодотворения и рождения детей достаточно высоки, несмотря на плохие результаты анализа спермы и/или повреждение ДНК сперматозоидов.
И при глубоком анализе ситуации, становится понятна безусловная клиническая ценность этого тестирования. Мы живем в эпоху, когда научные медицинские достижения зашли за грань вероятного, благодаря достижениям технического прогресса последних десятилетий. Репродуктивная медицина наших дней преодолевает многие из барьеров естественного отбора, которые крайне необходимы для эволюции человечества, как биологического вида.
Использование сперматозоидов с поврежденной ДНК при проведении ЭКО должно быть полностью исключено.
Фрагментация ДНК сперматозоидов приводит к нежелательным результатам, таким как:
- снижение частоты успешных беременностей;
- увеличение частоты выкидышей;
- хромосомных аномалий и других генетических или врожденных дефектов у потомства, даже если не у рождённых сейчас, то у последующих, не так далёких от нас, поколений человеческой популяции.
Следовательно, в эпоху ЭКО важно точно понимать, что используемая для процедуры сперма, должна гарантированно иметь целостность ядерной ДНК сперматозоидов. Хотя и для естественного запланированного зачатия детей важно учитывать тесты на определение фрагментации.
Учёные медики занимаются вопросами разработки возможных стратегий лечения для обширного повреждения ДНК спермы.
Анализ на фрагментацию ДНК – это тип теста на фертильность у мужчин, который измеряет количественный уровень поврежденной ДНК в образце спермы.


Удачи Вам!
В течение десятилетий тестирование фертильности у мужчин основывалось почти исключительно на базовом анализе спермы (спермограмма), который изучает:
- концентрацию;
- морфологию;
- подвижность сперматозоидов.
Тем не менее, около 30% мужчин, которые сталкиваются с бесплодием, после его проведения не получают ответа на вопрос, почему они бесплодны. То есть этот анализ спермы не достаточно адекватен, когда дело доходит до оценки потенциала фертильности у мужчин.
С его помощью можно определять наличие подвижных сперматозоидов, которые имеют нормальную форму, но нельзя оценить способность сперматозоидов к полноценному зачатию здоровых детей.
В последнее время растет понимание необходимости более качественного тестирования спермы. Полное изучение проводит расширенный тест качества спермы – тест Episona – это совершенно другой способ оценки качества спермы. Этот тест не нацелен на поиск общих повреждений ДНК, а ищет эпигенетические аномалии в определенных генах, играющих важную, подтверждённую научными исследованиями, ролью в фертильности и развитии эмбрионов.
Нарушения в этих генах тесно связаны с мужским бесплодием. Знание того, какие из этих генов затронуты, может дать чёткое понимание причин возникновения проблем.Но здесь мы поговорим о другом типе теста, который рассматривает фрагментацию ДНК спермы.
Анализы на фрагментацию ДНК спермы
Тестирование на фрагментацию ДНК спермы – определение уровня повреждений, наблюдаемых в ДНК спермы. Он предполагает вычисление процентного содержания в исследуемом материале сперматозоидов, имеющих разрывы в ДНК.
Сперматозоиды очень маленькие (самые маленькие клетки организма), но им нужно нести огромное количество генетической информации, которую при оплодотворении один из них добавит в яйцеклетку. Совместный генетический материал обеих этих гамет – мужской и женской, в итоге даст абсолютно уникальную генетическую основу для развития нового организма человека.
С таким количеством ДНК, упакованной в крошечную головку сперматозоида, возникают повреждения в хромосомах – разрывы ДНК. За последние десятилетия были проведены значительные исследования, позволившие определить как количество повреждений, наблюдаемых в ДНК сперматозоидов, может быть использовано в качестве маркера мужского бесплодия.
Но при том, что понимание повреждения ДНК спермы выросло, точная причина этого явления остается неизвестной.
Количество обнаруженных повреждений спермы не всегда соответствует таким параметрам сперматозоидов, как:
- количество сперматозоидов;
- подвижность;
- морфология.
Они могут иметь абсолютно нормальные значения, но при этом сперматозоиды могут иметь большое количество повреждений ДНК.
Интересно, что яйцеклетка обладает некоторой способностью восстанавливать поврежденную ДНК сперматозоидов после оплодотворения. Однако учёные предполагают, что может быть порог повреждения ДНК, превышающий способность яйцеклетки его восстановить.
Наиболее широко используемыми методами тестирования повреждений ДНК спермы человека,являются:
- оценка целостности ядерной ДНК сперматозоидов;
- оценка наличия аномалий упаковки хроматина сперматозоидов.
Прямые оценки целостности ДНК сперматозоидов включают в себя терминальный дезоксинуклеотидилтрансфераз-опосредованный дезоксиуридин-трифосфатный анализ метки конца (TUNEL) спередачей ядерных материалов на месте (ISNT), в котором используются реагенты, прикрепляющиеся непосредственно к поврежденной области.
Косвенные типы оценок целостности ДНК сперматозоидов включают анализ структуры сперматозоида хроматина (SCSA) и анализ дисперсии сперматозоида хроматина (SCD), которые косвенно измеряют поврежденную область посредством денатурации белка в кислотном растворе, а также анализ кометы.
Оценка упаковки сперматозоида хроматином – это метод окрашивания, в котором используются:
- метиловый зеленый;
- анилиновый синий;
- толуидиновый синий;
- хромомицин А3.
Рассмотрим наиболее широко используемые в настоящее время оценки фрагментации ДНК.
TUNEL анализ
TUNEL-анализ представляет собой метод, который непосредственно измеряет повреждение ДНК сперматозоидов, путем присоединения дезоксиуридинтрифосфата (dUTP) к одно- и двухцепочечным разрывам ДНК с использованием терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы.
При этом анализе есть возможность:
- Количественной оценки методом проточной цитометрии;
- Качественного определения с помощью флуоресцентной или световой микроскопии.
Значения, полученные при измерении количества используется как показатель оценки мужского бесплодия. Учёные медики считают, что беременность затруднена, если SDF, показанный в анализе TUNEL, превышает 12%. Анализ может быть выполнен с небольшим количеством сперматозоидов (200 сперматозоидов или меньше) в сперме или при биопсии яичка, поскольку отдельные клетки можно отличить друг от друга.
Этот метод выгоден отсутствием дополнительных затрат, ведь никаких новых реактивов и оборудования не требуется. Большинство клиник по лечению бесплодия могут проводить тесты на имеющихся в наличии флуоресцентных антителах и высококачественных микроскопах.
Однако этот метод более дорогой, чем другие. А результаты могут варьировать в зависимости от исследователя и лаборатории. То есть он имеет высокую субъективную и межлабораторную вариабельность. Также он ограничен в оценке незрелых клеток, таких как клетки с высокой окрашиваемостью ДНК в SCSA.
ISNT (insituник-трансляция)
ISNT представляет собой вариант оценки TUNEL. Он количественно определяет биотинилированный dUTP, который присоединяется к одноцепочечным разрывам ДНК через ДНК-полимеразу. Однонитевые разрывы ДНК имеют более высокую вероятность восстановления эмбрионом, чем двунитевые, и их связь с оплодотворением в исследованиях «in vivo» не была доказана.
Таким образом, клиническая ценность ISNT, которая измеряет только однонитевые разрывы, чрезвычайно ограничена, и ей также не хватает чувствительности по сравнению с другими оценками.
Анализ структуры хроматина сперматозоидов (SCSA)
Многие тесты были разработаны для измерения повреждения ДНК сперматозоидов, но все они используют слегка разные процедуры и приводят к различным стандартам измерения. Тест SCSA – наиболее широко применяемый на практике метод.
Он заключается в обработке спермы химическим красителем.В результате повреждённая ДНК спермы окрашивается в красный, а нормальная – в зелёный цвета. Степень денатурации ДНК определяется путем измерения изменений цвета акридинового оранжевого в ДНК от зеленой флуоресценции до красной флуоресценции после тепловой или кислотной обработки.
После окрашивания образец пропускается через чувствительную компьютеризированную аппаратуру со специальным программным обеспечением, которое считывает около 5000 сперматозоидов, классифицируя соотношение зеленых и красных. Так определяется индекс фрагментации (DFI).
Проведение исследований показало, что тестирование SCSA обнаружило повышенное содержание сперматозоидов с фрагментацией приблизительно у 20% пар, обследование которых ранее не дало никакого объяснения бесплодия.
Разработанный в 1970-х годах, SCSA несколько раз пересматривался, прежде чем стать наиболее распространенным, коммерчески используемым тестом для изучения причин мужского бесплодия, связанных с повреждением ДНК спермы и аномалиями хроматина.
Наиболее важными параметрами исследования являются:
- Индекс фрагментации ДНК (DFI,%), который указывает количество клеток с повреждением ДНК.
- HDS (%), который указывает долю незрелой спермы с дефектами в гистоне к протамину.
В более ранних исследованиях медики предполагали, что DFI 30% или выше, а показатель HDS 15% и выше, указывают на то, что вероятность оплодотворения «in vivo» будет близка к нулю. Позже учёные сообщили, что показатели HDS 15% и выше были связаны с более низким уровнем оплодотворения «invitro»(ЭКО).
То есть порог в 15% может быть показателем для ICSI –интраплазматической инъекции сперматозоида в яйцеклетку. Что показывает, что мужчины с высоким уровнем DFI (30% или выше) подвергаются большему риску низкого переноса бластоциты.
Это создает трудности для вынашивания беременности. Вышеперечисленные параметры могут предоставить ценную прогностическую информацию для пар, планирующих ЭКО или ИКСИ. Подготовка к ним может иметь большую эффективность с использованием результатов тестирования.
Преимущества теста состоят:
- В возможности быстрого анализа большого количества сперматозоидов из множества образцов могут быть быстро проанализированы;
- В высокой воспроизводимости;
- Отсутствии влияния замораживания на результаты теста, что делает его более гибким.
Недостатки заключаются в том, что:
- Для проведения испытаний требуется дорогостоящее оборудование.
- Нужна высокая концентрация сперматозоидов.
- Необходимо откалибровать эталонный диапазон для образца.
Интерпретация результатов фрагментации ДНК:
Расшифровка анализов всегда неоднозначна. Важное значение имеет клиническая оценка специалиста по поводу всей, конкретной ситуации в целом. Поэтому в медицине диагностика – индивидуальна в каждом конкретном случае.
Относительно вопросов, возникающих при получении результатов теста фрагментации ДНК, нужно задать их своему лечащему врачу. Чаще всего отчёт теста SCSA содержит ключ с четырьмя значениями, которые могут помочь понять результаты самостоятельно:
- Отлично: меньше или равно 15% DFI.
- Хорошо:более 15% но менее 25% DFI.
- Плохо: больше или равно 25% до 50% DFI.
- Очень плохо: больше или равно 50% DFI.
Следовательно, пациент с DFI 8,2% попадет в категорию «отлично». Процентное соотношение сперматозоидов, содержащих повреждение ДНК составляет здесь 8,2%.
Тест SCSA рекомендуется для того, чтобы пациенты с процентным содержанием DFI в анализе выше 25%, пропустили внутриматочную инсеминацию (IUI), сразу перейдя к ЭКО с применением ICSI – интраплазматической инъекции сперматозоида в яйцеклетку, для наибольшего успеха.
Клиническая полезность фрагментации ДНК.
Недавнее исследование показало, что у пациентов с DFI%, превышающим или равным 29%, значительно улучшился исход переноса оплодотворённого зародыша, при хирургических методах получения сперматозоидов (например, TESE / TESA, PICSI, IMSI) по сравнению с отсутствием процедуры вмешательства.
Тем не менее, другие исследования показывают, что существует небольшая разница в показателях беременности при ЭКО между нормальной и патологической фрагментацией ДНК.
Тестирование фрагментации ДНК проводилось в течение нескольких десятилетий. В результате широко распространено мнение, что бесплодие и фрагментация ДНК сперматозоидов связаны. Но этот тест до сих пор еще не является стандартным инструментом в клиниках по лечению бесплодия. Хотя высокий процент фрагментации ДНК может быть хорошим индикатором проблем с мужской стороны. Но его невозможно пока использовать, чтобы точно предсказать успех ЭКО.
Ясно, что необходимо провести дополнительные исследования клинической полезности фрагментации ДНК. Хотя тест на фрагментацию ДНК предоставляет дополнительную опцию для тестирования мужской фертильности, он, безусловно, имеет ограничения – может рассчитать процент разрушенной ДНК в сперме, однако, где происходят эти разрывы и на какие конкретно гены не определяет.
Метод ДНК комет (COMET анализ)
Кометный анализ — это простой и доступный метод тестирования, который качественно измеряет степень повреждения ДНК сперматозоидов путем визуализации одно- и двухцепочечных разрывов с помощью электрофореза. Появляется изображение, похожее на комету с полной головой и хвостом.
В головке «кометы» появляется двухцепочечная ДНК, тогда как поврежденные фрагменты двух- и одноцепочечной ДНК движутся в направлении хвостовой части. Чем выше уровень повреждения ДНК, тем ярче и длиннее хвост «кометы».
Дополнительные параметры, такие как диаметр ядра, момент оливкового хвоста и длина кометы, были использованы для повышения эффективности теста. Повреждение двухцепочечной ДНК может быть измерено в нейтральном буфере, но щелочной буфер может обнаружить все повреждения одно- и двухцепочечной ДНК, а также щелочно-лабильные участки.
Щелочной кометный анализ можно использовать для всех типов клеток, включая сперму, и для анализа требуется всего несколько клеток. Клиническое значение кометного анализа в оценке мужского бесплодия подтверждено многими учёными исследователями.
Тем не менее, протоколы анализа кометы не стандартизированы до такой степени, чтобы можно было полностью понять и сравнить результаты исследований от различных исследователей. В анализе щелочной кометы трудно различить эндогенные разрывы ДНК и индуцированные разрывы ДНК, и степень повреждения ДНК может быть недооценена из-за запутывания цепей ДНК.
Некоторые не рекомендуют клиническое использование этого анализа потому, что маленький кусочек хвоста может быть потерян или его трудно визуализировать.
Некоторые исследователи представили двухкомпонентный кометный анализ, который может различать одноцепочечные разрывы ДНК и двухцепочечные разрывы ДНК в одном и том же сперматозоиде. Они успешно использовали этот метод для исследования структуры и функции ДНК сперматозоидов.
Анализ дисперсии хроматина сперматозоидов – SCD
SCD-анализпредставляет собой метод тестирования, основанный на характерном «свечении» («нимбе»), которое образуется при удалении ядерных белков после денатурации кислоты. Другими словами, ядра сперматозоидов с серьезным повреждением ДНК будут образовывать очень маленький «нимб» или вообще его не иметь. В то время как сперма с меньшим повреждением ДНК будет рассеивать петли ДНК и образовывать большое «свечение».
Это экономически оправданный метод, который обычно используется в лабораториях мужского бесплодия, поскольку он прост, быстр, имеет высокую воспроизводимость и не требует сложных инструментов. Кроме того, управление качеством также является простым.
Однако периферийная граница «нимба» с низкой плотностью хроматина может иногда не отличаться от фона и не все «свечения»находятся в одной фокальной плоскости. Это может вызвать ошибки. А поскольку хвост спермы не сохраняется, сперма должна отличаться от других, случайно попавших сюда клеток.
Неоспорима важность тестирования SDF в обследовании пар, борющихся с проблемами фертильности. А также это имеет значение при стратегиях консультирования пациентов с высоким SDF на основе наблюдений, касающихся взаимосвязи между целостностью ДНК спермы и исходами беременности.
Многие исследования показали, что повреждение ДНК спермы влияет на естественное зачатие. На основании анализа SCSA сделан вывод, что высокий SDF затрудняет естественное зачатие. Естественное зачатие было почти невозможно, когда SCSA обнаружил SDF более 30%.
Кроме того, более высокая степень повреждения ДНК спермы у пар, планирующих беременность без предварительного обследования фертильности, показало в исследованиях, что им требуется больше времени для естественного зачатия и имеется пониженная вероятность успешного развития беременности.
Таким образом, тестирование SDF имеет значение для обследования мужской фертильности при попытках естественного зачатия и может применяться для пар, борющихся с бесплодием по неизвестной причине. Метод должен использоваться при консультировании таких пар относительно желания забеременеть.
Вспомогательные методы при ДНК фрагментации
Внутриматочная инсеминация
Вероятность беременности с использованием внутриматочной инсеминации (IUI) близка к нулю, когда DFI выше, чем 30% в SCSA.
Повышенная фрагментация (> 30%) является причиной снижения частоты беременности и родов после IUI.
Беременность была затруднена, когда метод TUNEL показал процент повреждения ДНК спермы 12% или выше.
Экстракорпоральное оплодотворение
Много исследований было проведено в отношении влияния SDF на результаты ЭКО и ЭКО / ИКСИ, но результаты этих исследований сложны и разнообразны. Это связано с трудностями интерпретации результатов исследований с неоднородным проведением и смешанными протоколами.
В большинстве исследований сообщалось, что SDF не влияет на оплодотворение или качество эмбрионов, скорее всего потому, что материнская регуляция играет доминирующую роль во время развития бластоциты, в то время как эффекты отцовских генов наблюдаются после четырехклеточной стадии. Недавние исследования подтвердили, что отцовские факторы и повреждение ДНК спермы влияют на развитие эмбрионов в ранней стадии беременности.
Интрацитоплазматическая инъекция спермы
Исследования по ЭКО и ИКСИ обнаружили, что повреждение ДНК спермы оказывает существенное влияние на частоту беременности. Разница в частоте беременности между группой с высоким повреждением сперматозоидов и группой с низким повреждением сперматозоидов составила 11%.
Повреждение ДНК сперматозоидов не приводило к значительной разнице в частоте клинической беременности после ИКСИ. Чем больше степень повреждения ДНК сперматозоидов, тем дольше требуется эмбриону, чтобы достичь стадии бластоцисты и снизить вероятность беременности через ИКСИ.
Тем не менее, коэффициент рождаемости более важен, чем клинический и текущий уровень беременности. Пары с низким уровнем повреждения ДНК сперматозоидов мужского пола имели высокие коэффициенты рождаемости после ЭКО и / или ИКСИ.
Влияние на результаты вспомогательной репродукции
Существуют противоречивые результаты относительно корреляции между повреждением ДНК сперматозоидов и результатами использования искусственных репродуктивных технологий (ART). Согласно некоторым исследованиям, повреждение ДНК спермы оказывает серьезное влияние на беременность, что означает, что тестирование ДНК спермы должно быть включено в рутинные клинические исследования.
Напротив, некоторые другие клинические обзоры не подтверждают клиническое использование тестов на повреждение ДНК спермы. В недавнем исследовании 120 клинических случаев, в которых анализировались результаты ART и повреждение ДНК сперматозоидов, из 92 патологических случаев, в которых анализировалась взаимосвязь между SDF и ART, в 35 наблюдалось значительное обратное соотношение между SDF и уровнем оплодотворения.
Но в других 57 исследованиях не было обнаружено существенных взаимосвязей. Обратная зависимость между повреждением ДНК спермы и скоростью оплодотворения для каждой процедуры была сильнее в ЭКО (59% или 19 из 32), чем в ИКСИ (24% или 10 или 42) или ЭКО и ИКСИ (33% или 6 из 18).
Неблагоприятное влияние повреждения ДНК на скорость оплодотворения чаще наблюдалось при процедурах ЭКО, в отличие от ИКСИ, при котором в яйцеклетку вводится наиболее морфологически нормальный и подвижный сперматозоид. Сперма, оплодотворяющая яйцеклетку при ЭКО, случайным образом выбирается при взаимодействии сперматозоидов с яйцеклетками.
Из 80 исследований, в которых анализировались SDF и качество эмбрионов, в 27 указывалось, что SDF оказывал значительное влияние на ДНК эмбрионов, в то время как в других 53 исследованиях не было выявлено значительной взаимосвязи между этими параметрами.
Рассматривая эти исследования аналитически, можно подвести итог:
1 | В 64% исследований, в которых использовался кометный анализ, указывали, что повреждение ДНК сперматозоидов оказывало неблагоприятное влияние на качество эмбрионов |
2 | Аналогичные результаты были показаны для 25% исследований TUNEL |
3 | Аналогично и 24% для SCSA исследования, |
4 | Аналогично и 40% исследований SCD |
5 | При классификации по типу ART 36% исследований ЭКО, 24% исследований ИКСИ и 50% смешанных исследований ЭКО и ИКСИ выявили неблагоприятные последствия повреждения ДНК. |
Таким образом, если исследования делятся по типу анализа, мы можем увидеть дифференциальную связь между повреждением ДНК спермы и качеством эмбриона. Тесты TUNEL и щелочной кометы, которые непосредственно измеряют повреждение ДНК, показали более тесную корреляцию с исходами беременности, чем SCSA и SCD, которые косвенно измеряют повреждение ДНК.
Потеря беременности.
Текущие исследования влияния SDF на выкидыш после ЭКО или ИКСИ показали, что повреждение ДНК спермы является прогностическим фактором потери беременности. При использовании анализа TUNEL повреждение ДНК сперматозоидов было более высоким у партнеров-мужчин, супруги которых перенесли повторный выкидыш (35%), чем в общей популяции (22%) или у нормальных фертильных мужчин (12%).
В исследовании, включающем 106 мужчин в парах, борющихся с проблемами фертильности, у которых в прошлом были выкидыши, обнаружили, что DFI 30% или выше был связан с высоким уровнем выкидыша и низким уровнем продолжающейся беременности.
То есть измерения SDF могут рассматриваться как полезный инструмент для прогнозирования выкидышей, связанных с отцовскими факторами.
Стратегии лечения пациентов с высоким уровнем повреждений ДНК спермы
Низкие показатели успешности беременности и высокий процент выкидышей прогнозируются даже при ЭКО или ЭКО и ИКСИ, когда у мужчин высокий уровень ДНК фрагментации сперматозоидов.
Поэтому исследуются методы снижения повреждения ДНК сперматозоидов до процедур вспомогательных репродуктивных технологий(ART) и методы отбора сперматозоидов с лучшим хроматином. Чтобы лечение мужского бесплодия было эффективным, важно понимать причины его возникновения.
Влияние образа жизни
Физические факторы, окружающей среды и образа жизни влияют на сперму и целостность ДНК. К ним относятся:
- радиоактивное излучение,
- тепло,
- сигаретный дым,
- загрязняющие воздух вещества,
- химические вещества, такие как противоопухолевые препараты,
- инфекции, передаваемые половым путем,
- естественные биологические факторы, такие как увеличение возраста мужчины,
- повышенный индекс массы тела,
- диабет.
Модификация образа жизни – самый фундаментальный, важный, простой и легкий способ улучшить качество спермы. Мужчины с нарушенным качеством спермы должны:
- бросить курить и пить алкогольные напитки;
- заниматься физическими упражнениями;
- управлять своим весом;
- носить свободное белье;
- избегать условий с высокой температурой, таких как сауны, купание в горячей ванне или в горячих природных естественных источниках;
- сменить рабочее место с высокой температурой;
- воздерживаться от семяизвержения в течение рекомендуемого врачами специалистами периода времени.
Инфекционный контроль
Исследования показали, что инфекция и воспаление мужских половых путей наблюдаются в 8–35% случаев мужского бесплодия.Именно инфекции мужской половой системы вызывают повреждение ДНК сперматозоидов. Участвующие в воспалении клетки продуцируют активные формы кислорода, которые вызывают модификации основания ДНК и повреждение ДНК.
Белые кровяные клетки – лейкоциты, обнаруженные в сперме, происходят из эпидидимиса и мужского полового тракта, а антиоксиданты в семенной плазме поглощают активные формы кислорода, вырабатываемые белыми кровяными клетками. Однако, когда образуется большое количество активных форм кислорода, ДНК сперматозоидов повреждается окислительным стрессом.
Пероральная антиоксидантная терапия
15% пар репродуктивного возраста испытывают проблемы с фертильностью, а 50% этих случаев связаны с проблемами у мужчин. Однако многие пациенты мужского пола не знают причин олигоастенотератозооспермии. Известно, что окислительный стресс является важным фактором, который вызывает мужское бесплодие, повреждая ДНК сперматозоидов.
Доказано, что пациенты, которые принимали антиоксиданты перед процедурой ИКСИ, не демонстрировали различий в степени фертильности, скорости расщепления или морфологии эмбрионов, но имели более высокие показатели клинической беременности и имплантации. Например терапия такими антиоксидантами, как витамин E, витамин C, селен, коэнзим Q10, N-ацетилцистеин, цинк и L-карнитин были эффективным.
Среди них витамин С и витамин Е показали наибольший эффект в снижении фрагментации ДНК, а цинк и селен чуть меньше, но также оказывали аналогичное воздействие. Тем не менее, необходимы дополнительные исследования, поскольку не существует стандартизированных руководств по лечению бесплодия у мужчин с высоким уровнем окислительного повреждения.
Хирургическое вмешательство при варикозе вен яичек
Варикоцеле вызывается аномальной дилатацией вен пампиноформного сплетения и встречается у 15% мужчин. Это одна из наиболее распространенных причин мужского бесплодия, которую можно исправить хирургическим путем.
Он обнаружен у 35% пациентов с мужским бесплодием и у 70% пациентов с вторичным бесплодием.
Наиболее высокие уровни SDF наблюдались у пациентов с варикоцеле. Повышенные уровни активных форм кислорода повреждают как ядерную, так и митохондриальную ДНК, вызывая модификации оснований, разрывы нитей и поперечные связи хроматина, а также увеличивая повреждение ДНК сперматозоидов.
Хирургическое восстановление улучшает параметры спермы и считается более рентабельным, чем ЭКО / ИКСИ. Среди хирургических методов наиболее эффективный – микрохирургическая варикоцелэктомия с использованием субингвинального подхода.
Отбор сперматозоидов на основе микроманипуляции
Во многих исследованиях изучались методы отбора сперматозоидов с меньшим повреждением ДНК при проведении ART. Некоторые такие методы включают:
- центрифугирование в градиенте плотности,
- электрофоретическое выделение сперматозоидов с использованием сортировщика клеток,
- метод связывания гиалуроновой кислоты,
- магнитную сортировку сперматозоидов,
- микроскопию с большим увеличением.
Известно, что обработка и отбор сперматозоидов и эмбрионов снижают неблагоприятные репродуктивные результаты ИКСИ, вызванные повреждением ДНК сперматозоидов, и многие клиники, специализирующиеся на фертильности, в настоящее время применяют эти методы.
Тем не менее, нет четких клинических доказательств того, что любой из этих методов поможет избежать потенциально вредного воздействия аномальной спермы на результаты ART. Технологии отбора сперматозоидов сталкиваются с ограничениями, поскольку ни один из существующих методов не может полностью предотвратить отбор сперматозоидов с повреждением ДНК.
Забор сперматозоидов из яичка
Сперматозоиды яичка, как правило, имеют меньшее повреждение ДНК и лучшую целостность ДНК, чем эякулированная сперма. Однако из-за некоторых генетических и эпигенетических рисков, возникли сомнения относительно использования сперматозоидов яичка.
Ретроспективный анализ неонатальных данных о рождении путем инъекции сперматозоидов от обструктивных и необструктивных мужчин с азооспермией не выявил существенных различий в краткосрочных неонатальных исходах. Аналогично, не было никаких существенных различий в частоте врожденных пороков развития у потомков ИКСИ от сперматозоидов яичка.
Сперматозоиды яичка имеют в три-пять раз меньшую долю фрагментации ДНК, чем сперматозоиды из эякулята. В недавнем сравнительном исследовании по использованию сперматозоидов яичка для ИКСИ у 172 пациентов с высоким уровнем повреждения ДНК сперматозоидов было обнаружено, что доля повреждения ДНК сперматозоидов яичка (8,3%) была в пять раз ниже, чем у эякулированной ДНК спермы (40,9%).
Лучшие репродуктивные результаты были продемонстрированы при использовании сперматозоидов яичка для ИКСИ в группе пациентов, у которых продолжалась олигозооспермия и высокий уровень повреждения ДНК сперматозоидов даже после антиоксидантной терапии.
Коэффициент рождаемости в группе ИКСИ, которая использовала сперматозоиды яичка, составлял 46,7%, в то время как коэффициент рождаемости в группе ИКСИ, которая использовала эякулированную сперму, составлял 26,4%. Относительные риски выкидыша и рождения составили 0,29 и 1,76 соответственно.
Кроме того, частота клинических беременностей была низкой, а риск выкидыша был высоким, когда проводилась ЭКО / ИКСИ с эякулированной спермой с высоким уровнем повреждения ДНК. Следовательно, использование сперматозоидов яичка для следующего цикла ИКСИ может быть более эффективным для пар, которые имеют высокий уровень СДФ и имеют историю неудачных ЭКО / ИКСИ.
Методы тестирования повреждения ДНК сперматозоидов не имеют четко стандартизированных уровней интерпретации результатов. Каждый метод имеет свои преимущества и недостатки, что затрудняет его утверждение в качестве универсального, предпочтительного метода.
Репродуктивная система человека является сложной, и трудно предсказать результат динамического взаимодействия между несколькими факторами, которые могут нарушать фертильность, с помощью одного теста. Выбирайте метод тестирования, основанный на клинических характеристиках и Ваших целях.
Поскольку тесты на повреждение ДНК клеток спермы дают генетическую информацию от мужских репродуктивных клеток, в отличие от простой информации, которую предоставляет спермограмма, в будущем хорошо бы проводить дополнительные исследования методов отбора сперматозоидов с неповрежденной ДНК при ART.
Каждая пара, которая решает проблемы бесплодия, самостоятельно решает где сделать анализы, в том числе касающиеся ДНК фрагментации сперматозоидов. Важное значение при этом выборе имеет уровень клиники, а также цена, которая имеет разницу в разных медицинских учреждениях и в среднем колеблется от 6000 до 9000 рублей.
Уважаемые читатели, прошу вас дать обратную связь — анонимно проголосовать ниже за качество информации чтобы я поняла насколько хорошо раскрыта тема.

Спасибо!